Хромогенные и микрокристаллоскопические реакции Габапентина

Введение

Габапентин – противоэпилептическое лекарственное средство, производное гамма-аминомасляной кислоты, оказывает противосудорожный и анальгетический фармакологические эффекты. Используется в качестве дополнительной терапии при парциальных припадках с вторичной генерализацией и при нейропатических болях.

В последнее десятилетие произошел резкий рост немедицинского использования габапентина, особенно среди пациентов, зависимых от опиоидов. Габапентин потенцирует действие седативных препаратов, что может привести к ухудшению состояния и вызвать риск передозировки. В литературе встречаются достаточно частые упоминания, связанные с развитием зависимости и отравлениями габапентиноидами (габапентин, прегабалин), в том числе их совместное употребление с опиатами. В общей популяции распространенность злоупотреблений составляет 1.6%, тогда когда этот показатель колеблется от 3%  до 68% у опийных наркоманов. Воздействие чрезмерно высоких доз в организме все  чаще  выясняются в посмертных анализах токсикологии [7,8, 9].

С целью диагностики отравлений и злоупотреблений в химико-токсикологическом и судебно-химическом анализе достаточно часто используют химические и физико-химические методы исследования биологического материала. Метод микрокристаллоскопии не утратил своего значения в качестве дополняющего качественного анализа на лекарственные препараты, в извлечениях из биологических объектов, после проведения предварительной очистки извлечения.

Метод микрокристаллоскопии дает возможность получить информацию о природе токсикантов в короткий срок при минимальном объеме образца и позволяет исключить такие громоздкие операции как прокаливание и фильтрование. Также не утратили своей силы такие методы анализа, как хромогенные реакции. Данные реакции отличаются простотой, наглядностью, не требуют использования сложной и дорогостоящей аппаратуры.

Исходя из изученных литературных данных было установлено, что габапентин не был изучен хромогенными и микрокристаллоскопическими реакциями.

Наиболее широко используются в качестве хромогенных реакций в химико-токсикологическом анализе на наркотические и психотропные вещества такие реактивы как: кислоту серную концентрированную, Марки, Эрдмана, 5% раствор железа (III) хлорида, кислоту азотную концентрированную, Фреде, Бушарда(Вагнера), Майера, гексацианоферрат  (II) калия, фуксинуксусная кислота.

В качестве микрокристаллоскопических реакций: Реактив Бушарда, раствор хлорцинкйода, водный раствор индигокармина, растовр индигокармина в ледяной уксусной кислоте,  раствор пикриновой кислоты, раствор дихлорида ртути, раствор гексацианоферрата (II) калия, реактив Драгендорфа, реактив Стефана 1, Стефана 2, аммиачный раствор AgNO3, хромовая смесь, калия хлорид [2].

Микрокристаллоскопический анализ основан на обнаружении веществ по форме, величине и окраски кристаллов. В большинстве случаев для идентификации химических соединений с помощью микрокристаллоскопического метода определяют форму и окраску не самих веществ, а кристаллических продуктов, которые образуются при взаимодействии исследуемого вещества с соответствующими реактивами.

Ограниченное число форм кристаллов, образующихся при микрокристаллоскопических реакциях, и большое число веществ, которые определяют с помощью этих реакций, является недостатком этого метода. Понижения специфичности микрокристаллоскопических реакций служит этому причиной. Исключить возможность ошибки при оценке результатов микрокристаллоскопических реакций, можно с помощью контрольных опытов.

Целью нашей работы является исследование габапентина с помощью хромогенных и микрокристаллоскопических реакций.

Для выполнения микрокристаллоскопических реакций использовали реактивы, представляющие собой кислоты, соли, роданидные и йодидные комплексы металлов, рекомендуемые для проведения микрокристаллоскопического анализа, а также красители.

Микрокристаллоскопические реакции проводили на чистых предметных стеклах, на которые наносили спиртовые растворы габапентина, и добавляли к ним растворы соответствующих реактивов, предметные стекла ставили во влажные камеры [1,2]. Рост кристаллов обнаруживаемых и распознаваемых проходил во влажной камере, в течение 20-40 минут, а некоторые из них в течении нескольких часов.

Всего в работе микрокристаллоскопического анализа использовали 13 реактивов: хлорцинкйод, Стефана 1, Стефана 2, йодная вода, аммиачный раствор серебра нитрата, хромовая смесь, пикриновая кислота, гексацианоферрат  (II) калия, кальция хлорид и концентрированная серная кислота, 0,3% водный раствор индигокармина, хлорид ртути, индигокармин в ледяной уксусной кислоте, реактив Драгендорфа.

Исследование проводили при температуре окружающей среды 25±2°С

Методика анализа микрокристаллоскопических реакций: на предметное стекло наносили 0,1 % спиртовый раствор габапентина, после удаления органического растворителя добавляли каплю 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной и каплю соответствующего реактива. Параллельно проводили реакции без добавления раствора кислоты хлористоводородной. Исследуемые капли на предметных стеклах соединяли стеклянной палочкой и помещали во влажные камеры для образования и роста кристаллов.

Затем под микроскопом «Levenhuk Rainbow 2L/D2L/2LPLUS Microscopes» при увеличении в 10Х раз наблюдали форму и окраску образовавшихся кристаллов. Параллельно проводили контрольный опыт (каплю реактива на предметном стекле соединяли с каплей 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной), для подтверждения того, что образовавшиеся кристаллы являются продуктом взаимодействия исследуемого вещества с реактивом. Результаты реакций приведены в таблице 1.  

Таблица 1.

Результаты микрокристаллоскопических реакций

Габапентин образовывал характерные кристаллы с соответствующими реактивами. Форма и окраска кристаллов представлена на фотографиях (рисунок 1). 

Рисунок 1. Микрокристаллоскопические реакции габапентина с соответствующими реактивами:

А. с реактивом аммиачного раствора серебра нитрата. Б. с реактивом пикриновой кислоты. В. с реактивом водный раствор 0,3% индигокармина. Г. с реактивом индигокармин в смеси ледяной уксусной кислоты и воды.

Методика анализа хромогенных реакций: на фарфоровую чашку вносили 0,1% спиртовый раствора габапентина, высушивали и к сухому остатку добавляли 1 каплю соответствующего реактива, параллельно проводили контрольный опыт, для подтверждения того, что образовавшаяся окраска является продуктом взаимодействия исследуемого вещества с реактивом. Исследование проводили на фарфоровых чашках без нагревания и с нагреванием до 80˚С. Полученные данные представлены в таблице 2:

Таблица 2.

Результаты хромогенных реакций габапентина

Заключение

Предложенная нами методика качественного анализа габапентина с помощью хромогенных и микрокристаллоскопических реакций может использоваться в дополнение к  химическим и физико-химическим методам исследования габапентина в контрольно-аналитических, химико-токсикологических и судебно-химических лабораториях в анализе, как самого препарата, так и при исследовании извлечений из биологических объектов после проведения их предварительной очистки.