Изучение содержания дубильных веществ и их количественное определение в траве Empetrum hermaphroditum, произрастающей в Приморском районе Архангельской области
Конференция: XXII Международная научно-практическая конференция «Научный форум: медицина, биология и химия»
Секция: Фармацевтическая химия, фармакогнозия
XXII Международная научно-практическая конференция «Научный форум: медицина, биология и химия»
Изучение содержания дубильных веществ и их количественное определение в траве Empetrum hermaphroditum, произрастающей в Приморском районе Архангельской области
Аннотация. Проведено исследование качественного состава воздушно-сухого сырья водяники гермафродитной на наличие дубильных веществ, осуществлено определение суммарного количества дубильных веществ методом перманганатометрии.
Ключевые слова: трава водяники гермафродитной; качественный состав; количественное определение; дубильные вещества; метод перманганатометрии.
На сегодняшний день развитие химической промышленности и создание новых высокоэффективных лекарственных препаратов достигло глобальных масштабов, но для лечения и профилактики многих заболеваний до сих пор актуально использование препаратов на основе лекарственного растительного сырья.
Водяника гермафродитная является нефармакопейным растением, широко произрастающим в Северном полушарии, на Дальнем Востоке, в Сибири и на Сахалине, Камчатке и Курильских островах, в том числе в Приморском районе Архангельской области и представляет собой вечнозелёный низкорослый стелющийся кустарничек семейства Вересковые с листьями, похожими на хвоинки, и невзрачными цветками [3].
Все части растения Empetrum hermaphroditum находят широкое применение в народной медицине. Из них готовят настои и отвары и используют их для лечения параличей, желудочных заболеваний, эпилепсии. Плоды водянки отлично утоляют жажду и обладают мочегонным эффектом. Сок растения оказывает успокаивающее действие на нервную систему и снимает напряжение, также улучшает обмен веществ и способствует уменьшению или полному избавлению от головной боли [3].
Большое значение для медицины имеет использование препаратов, содержащие в своем составе дубильные вещества, которые обладают рядом различных терапевтических свойств, а именно эти вещества обладают противовоспалительным и вяжущим действием, а благодаря их способности образовывать осадки с алкалоидами, гликозидами и солями тяжелых металлов они могут применяться в качестве противоядий при пероральном отравлении этими веществами [2, 3].
Качественный состав биологически активных веществ водяники гермафродитной достаточно изучен и довольно разнообразен.
Он представлен тритерпеновыми сапонинами, флавоноидами (кверцетин, кемпферол, рутин), дубильными веществами (до 4,5 %), смолами, эфирными маслами, кумаринами, так же в плодах и траве водяники содержатся бензойная и уксусная кислоты, витамины (в частности витамин С), антоцианы, каротин, различные микроэлементы, в том числе марганец, сахара [3].
В связи с этим целью настоящего исследования явилось подтверждение наличия дубильных веществ в растительном сырье водяники гермафродитной, произрастающей в Приморском районе Архангельской области, а также определение их количественного содержания.
Материалом для исследования послужило воздушно-сухое растительное сырье – трава водяники гермафродитной, собранной в Приморском районе Архангельской области.
Наличие дубильных веществ в сырье водяники подтверждали несколькими качественными реакциями: реакция с 1 %-ым раствором желатины, с кристаллами нитрита натрия и 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты, с растворами аммиака и натрия фосфорномолибденовокислого в хлористоводородной кислоте.
В ходе проведения данных реакций отмечалось выпадение белого осадка, который растворялся в избытке реагента, появление коричневого и синего окрашивания водного извлечения соответственно [1, 5].
Количественное содержания дубильных веществ определяли в воздушно-сухом сырье, предварительно установив его влажность.
Влажность растительного сырья определяли в соответствии с методикой, которая изложена в общей фармакопейной статье «Потеря в массе при высушивании».
Для проведения определения нам необходимо взять 2,0 г (точная навеска) растительного сырья, которые помещаем в бюкс, предварительно высушенный до постоянной массы и взвешенный в тех же условиях, в которых проводим испытания.
Испытуемый образец сушим с открытой крышкой бюкса в течение часа, затем открытый бюкс вместе с крышкой помещаем в эксикатор для охлаждения, после чего закрываем бюкс крышкой и взвешиваем.
Данную операцию проводим до установления постоянной массы.
Потерю в массе при высушивании (Х) в процентах вычисляем по формуле:
где: m1 – масса бюкса, доведенного до постоянной массы, г;
m2 – масса бюкса с испытуемым образцом до высушивания, г;
m3 — масса бюкса с испытуемым образцом после высушивания, г.
Результаты определения влажности растительного сырья методом высушивания представлены в таблице 1.
После установления влажности растительного сырья проводим количественное определение дубильных веществ.
Методика перманганатометрии является фармакопейной и основана на реакции окисления дубильных веществ раствором калия перманганата. Поскольку перманганат калия окисляет все фенольные соединения, то этот метод не избирателен относительно дубильных веществ, что в итоге может объяснить большое значение погрешности среднего результата.
Таблица 1.
Результаты определения влажности методом высушивания
Масса бюкса, г |
Масса бюкса с навеской до высушивания, г |
Масса бюкса с навеской после высушивания, г |
Влажность, % |
26,6983 |
28,6984 |
28,5775 |
6,04% |
35, 6762 |
37,6775 |
37,5607 |
5,84% |
34,4400 |
36,4412 |
36,3178 |
6,17% |
33,5708 |
35,5837 |
35,4662 |
5,85% |
Ср=5,98% |
Определение проводили следующим образом: точную навеску измельченного, предварительно просеянного до размера частиц 1 мм, сырья помещали в коническую колбу объемом 500 мл и заливали 250 мл воды очищенной, которую предварительно нагревали до кипения.
Кипячение проводилось с обратным холодильником в течение 30 мин, периодически встряхиваясь.
Полученное извлечение охлаждали и далее фильтровали через вату в мерную колбу вместимостью 250 мл так, чтобы частицы сырья не попали в фильтрат, после чего доводили объем раствора водой до метки и перемешивали. 25,0 мл полученного водного извлечения помещали в коническую колбу вместимостью 1000 мл, прибавляли 500 мл воды, 25 мл раствора индигосульфокислоты и титровали при постоянном перемешивании 0,02 М раствором калия перманганата до золотисто-желтого окрашивания. Параллельно проводим контрольный опыт.
Для этого в коническую колбу вместимостью 1000 мл помещаем 525 мл воды, 25 мл раствора индигосульфокислоты и титруем при постоянном перемешивании 0,02 М раствором калия перманганата также до появления золотисто-желтого окрашивания [1, 4].
Содержание дубильных веществ (Х) в процентах в пересчете на танин вычисляем по формуле:
где: V – объем 0,02 М раствора калия перманганата, израсходованного на титрование водного извлечения, в миллилитрах;
V1 - объем 0,02 М раствора калия перманганата, израсходованного на титрование в контрольном опыте, в миллилитрах;
0,004157 – количество дубильных веществ, соответствующее 1 мл 0,02 М раствора калия перманганата (в пересчете на танин), в граммах;
250 – общий объем водного извлечения, в миллилитрах
a – навеска сырья или лекарственного растительного препарата, в граммах;
25 – объем водного извлечения, взятого для титрования, в миллилитрах;
W – влажность лекарственного растительного сырья или лекарственного растительного препарата, в процентах [1, 4].
В ходе работы было проведено 6 повторений определения. Результаты количественного определения дубильных веществ методом перманганатометрии в период цветения водяники гермафродитной представлены в таблице 2.
Таблица 2.
Результаты количественного определения дубильных веществ методом перманганатометрии
Масса навески растительного сырья, г. |
Объем перманганата калия (0,02 моль/л) пошедшего на титрование полученного извлечения из РС, мл |
Количество ДВ, % |
Метрологические характеристики |
0,9866 |
2,4 |
4,30 |
4,74±0,29 |
1,0020 |
2,5 |
4,59 |
|
1,0017 |
2,5 |
4,59 |
|
2,0051 |
3,5 |
5,07 |
|
1,03385 |
2,5 |
4,79 |
|
0,97045 |
2,5 |
5,10 |
|
Ср=1,3999 |
2,65 |
4,74 |
|
Присутствие значительного количества дубильных веществ 4,74±0,29 в траве водяники гермафродитной может обуславливать ее фармакологическое действие.
Выделение этих веществ из растительного сырья и обнаружение новых биологически активных веществ позволит разработать и произвести большое количество новых лекарственных препаратов, а водянику гермафродитную отнести к списку фармакопейных лекарственных растений.